Department of Biology, Rize Faculty of Arts & Sciences, Karadeniz Technical University, 53050 Rize - TURKEY
Amaç: Bu çalışmanın amacı, insanın normal fekal florasından izole edilen ampisiline dirençli (Ampr) Escherichia coli izolatlarında β-laktamaz genlerinin taşıyıcılığının araştırılmasıydı. Yöntemler: En az üç ay boyunca antibiyotik kullanmamış 21 sağlıklı kişinin dışkı örneklerinden izole edilen 10 Ampr E. coli suşu TEM-, SHV-, ve OXA-tipi β-laktamaz genleri açısından polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) ile tarandı. Suşların antibiyotiklere hassasiyetleri disk difüzyon metodu ile, ampisilinin suşlara karşı minimum inhibitör konsantrasyonu (MİK) agar sulandırım metodu ile belirlendi. Plazmit aktarma deneyleri sıvıda çiftleşme metodu ile yapıldı. Plazmit DNA'sı alkali lizis tekniği ile izole edildi. Hibridizasyon deneylerinde digoxygenin ile işaretli TEM-1 probu kullanıldı. Bulgular: On suşun ikisinin PZR ile yalnızca TEM-tipi geni (blaTEM) taşıyıcısı olduğu bulundu ve ampisiline karşı dirençleri konjugatif olarak bir rekombinant E. coli K-12 suş C600'e aktarıldı. Ampisilinin iki orijinal suşa ve transkonjugantlarına karşı MİK'leri >512 µg/mL olarak tespit edildi. Ayrıca, bu iki suş ve transkonjugantlarında β-laktamaz inhibitör direnci de gözlendi. Digoxygenin ile işaretli TEM-1 DNA probu TEM-geni taşıyan iki organizmadan izole edilmiş olan bazı non-konjugatif fakat taşınabilir plazmit DNA'larına hibridize oldu. Sonuç: Bu sonuçlar; barsak ortamında β-laktamaz geni taşıyan kommensal E. coli suşlarının direnç determinantlarını küçük direnç plazmitleri (R plazmit) üzerinde taşıyabildiğini ve yakın zamanda antibiyotik kullanılmasa dahi bunların toplumda direnç genlerinin potansiyel bir rezervuarı haline gelebileceğini göstermektedir.